ПІДСУМОК ТА ПОЯСНЕННЯ ТЕСТУ
Малярія — це гемолітична гарячкова хвороба, що передається комарами, щороку заражає понад 200 мільйонів людей і вбиває понад 1 мільйон людей.Викликається чотирма видами Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale і P. malariae.Всі ці плазмодії інфікують і руйнують еритроцити людини, викликаючи озноб, лихоманку, анемію та спленомегалію.P. falciparum викликає більш серйозні захворювання, ніж інші види плазмодіїв, і є причиною більшості випадків смерті від малярії.P. falciparum і P. vivax є найпоширенішими патогенами, однак існують значні географічні варіації в поширенні видів.
Традиційно малярію діагностують за виявленням мікроорганізмів у товстих мазках периферичної крові, пофарбованих за Гімзою, а різні види плазмодія розрізняють за їх появою в інфікованих еритроцитах.Техніка здатна встановити точну та надійну діагностику, але лише тоді, коли її виконують кваліфіковані мікроскопісти з використанням певних протоколів, що створює серйозні перешкоди для віддалених і бідних регіонів світу.
Швидкий тест на малярію Pf/Pv Ag розроблено для вирішення цих перешкод.Він використовує антитіла, специфічні до P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) і до P. vivax лактатдегідрогенази (Pv-LDH), щоб одночасно виявити та диференціювати інфекцію P. falciparum і P. vivax.Тест може проводитися непідготовленим або мінімально кваліфікованим персоналом без лабораторного обладнання
ПРИНЦИП
Швидкий тест на малярію Pf/Pv Ag — це хроматографічний імунологічний аналіз з бічним потоком.Компоненти тест-смужки складаються з: 1) кон’югатної подушечки бордового кольору, що містить мишаче анти-Pv-LDH антитіло, кон’югатоване з колоїдним золотом (Pv-LDH-золото-кон’югати) та мишаче анти-pHRP-II антитіло, кон’юговане з колоїдним золотом (pHRP-II-золото-кон’югати), 2) нітроцелюлозну мембранну смужку, що містить дві тестові смужки (смуги Pv і Pf) і контрольну смужку ( діапазон C).Смуга Pv попередньо покрита іншим мишачим специфічним антитілом проти Pv-LDH для виявлення інфекції Pv, смуга Pf попередньо покрита поліклональними антитілами до pHRP-II для виявлення інфекції Pf, а смуга C покрита козячим антимишачим IgG.
Під час аналізу достатній об’єм зразка крові розподіляється в лунку для зразка (S) тест-касети, буфер для лізису додається в буферну лунку (B).Буфер містить детергент, який лізує еритроцити та вивільняє різні антигени, які капілярно мігрують через смужку, що міститься в касеті.Pv-LDH, якщо він присутній у зразку, зв’яжеться з кон’югатами Pv-LDH-золото.Потім імунокомплекс захоплюється на мембрані попередньо покритим антитілом проти Pv-LDH, утворюючи смугу Pv бордового кольору, що вказує на позитивний результат тесту Pv.Альтернативно, pHRP-II, якщо присутній у зразку, зв’яжеться з кон’югатами pHRP-II-золото.Потім імунокомплекс захоплюється на мембрані попередньо покритими антитілами проти pHRP-II, утворюючи смугу Pf бордового кольору, що вказує на позитивний результат тесту на Pf.Відсутність тестових смужок свідчить про негативний результат.Тест містить внутрішній контроль (смуга С), яка повинна демонструвати смугу бордового кольору імунокомплексу кон’югатів козячого антимишачого IgG / мишачого IgG (анти-Pv-LDH і анти-pHRPII)-золота, незалежно від розвитку кольору будь-якої з тестових смужок.В іншому випадку результат тесту буде недійсним, і зразок необхідно перевірити повторно за допомогою іншого пристрою.
