ПІДСУМОК ТА ПОЯСНЕННЯ ТЕСТУ
Малярія — це гемолітична гарячкова хвороба, що передається комарами, щороку заражає понад 200 мільйонів людей і вбиває понад 1 мільйон людей.Викликається чотирма видами Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale і P. malariae.Всі ці плазмодії інфікують і руйнують еритроцити людини, викликаючи озноб, лихоманку, анемію та спленомегалію.P. falciparum викликає більш серйозні захворювання, ніж інші види плазмодіїв, і є причиною більшості випадків смерті від малярії.P. falciparum і P. vivax є найпоширенішими патогенами, однак існують значні географічні варіації в поширенні видів.
Традиційно малярію діагностують за виявленням мікроорганізмів у товстих мазках периферичної крові, забарвлених за Гімзою, а різні види плазмодіїв розрізняють за їх появою в інфікованих еритроцитах1.Техніка дає можливість точної та надійної діагностики, але лише тоді, коли її виконують кваліфіковані мікроскопісти з використанням визначених протоколів2, що створює серйозні перешкоди для віддалених і бідних регіонів світу.
Швидкий тест на малярію Pf/Pan Antigen розроблено для вирішення цих перешкод.Тест використовує пару моноклональних і поліклональних антитіл до специфічного білка P. falciparum, протеїну повторення гістидину II (pHRP-II) і пару моноклональних антитіл до лактатдегідрогенази (pLDH) плазмодія, білка, що виробляється чотирма видами плазмодія, що дозволяє одночасно виявляти та диференціювати інфекцію P. falciparum та будь-яким іншим. три плазмодія.Його може виконувати непідготовлений або мінімально кваліфікований персонал, без лабораторного обладнання.
ПРИНЦИП
Швидкий тест Pf/Pan Malaria Rapid Test Kit — це латеральний імунологічний хроматографічний аналіз.Компоненти тест-смужки складаються з: 1) кон’югатної подушечки бордового кольору, що містить мишаче антитіло до pHRP-II, кон’югатоване з колоїдним золотом (pHRP II-кон’югати золота) та мишаче антитіло до pLDH, кон’югатоване з колоїдним золотом (pLDH-кон’югати золота),
2) смужка нітроцелюлозної мембрани, що містить дві тестові смуги (смуги Pan і Pv) і контрольну смугу (смуга C).Пан-смуга попередньо покрита моноклональним антитілом проти pLDH, за допомогою якого можна виявити інфекцію будь-яким із чотирьох видів плазмодіїв, смуга Pf попередньо покрита поліклональними антитілами до pHRP-II для виявлення Pf-інфекції, а смуга C покрита козячим антимишачим IgG.
Під час аналізу достатній об’єм зразка крові розподіляється в лунку для зразка (S) тест-касети, буфер для лізису додається в буферну лунку (B).Буфер містить детергент, який лізує еритроцити та вивільняє різні антигени плазмодія, які капілярно мігрують через смужку, що міститься в касеті.pHRP-II, якщо присутній у зразку, зв’яжеться з кон’югатами pHRP II-золото.Потім імунокомплекс захоплюється на мембрані попередньо покритими антитілами проти pHRPII, утворюючи смугу Pf бордового кольору, що вказує на позитивний результат тесту на Pf.pLDH, якщо присутній у зразку, зв’яжеться з кон’югатами золота pLDH.Потім імунокомплекс захоплюється на мембрані попередньо покритим антитілом проти pLDH, утворюючи смугу Pan бордового кольору, що вказує на позитивний результат тесту на плазмодій.За відсутності смуги Pan можна рекомендувати позитивний результат тесту для будь-якого з інших трьох плазмодіїв.
Відсутність будь-яких тестових смуг (Pan і Pf) свідчить про негативний результат.Тест містить внутрішній контроль (смуга C), яка повинна демонструвати смугу бордового кольору імунокомплексу козячого антимишачого IgG / мишачого IgG (кон’югати pHRP-II і pLDH-золото) незалежно від розвитку кольору будь-якої з тестових смужок.В іншому випадку результат тесту буде недійсним, і зразок необхідно перевірити повторно за допомогою іншого пристрою.
